T4 DNК -лигаза, высокой концентрации

Особенности

• Активные рестрикционные ферменты, ПЦР и RT-буферы (при добавлении АТФ)
• Лигирование с быстрым липким концом завершают в течение 10 минут при комнатной температуре
• Поставляется с раствором ПЭГ для эффективного лигирования на тупых концах

Применение

• Клонирование рестрикционных ферментов генерирует фрагменты ДНК
• Клонирование продуктов ПЦР
• Соединение двухцепочечных олигонуклеотидных линкеров или адаптеров к ДНК
• Сайт-направленный мутагенез
• Полиморфизм длины расширенного фрагмента (AFLP)
• Лигаза-опосредованное обнаружение РНК
• Ремонт никеля в дуплексной ДНК, РНК или ДНК / РНК-гибридах
• Самоклассификация линейной ДНК.

Включает

• T4 ДНК-лигаза
• 10X T4 ДНК-лигазный буфер
• 50% раствор ПЭГ

Заметки

• Связывание T4 ДНК-лигазы с ДНК может привести к сдвигу полосы в агарозных гелях. Чтобы этого избежать, инкубируйте образцы с 6X ДНК загрузочным красителем и раствором СДС при 70 °C в течение 5 мин или 65 °C в течение 10 минут и охладите на льду перед электрофорезом.
• Объем реакционной смеси лигирования не должен превышать 10% от объема компетентной ячейки в процессе трансформации.
• Перед электро-трансформацией удалите T4 ДНК-лигазу из лигирующей смеси, используя спиновые колонки или экстракцию хлороформа. Выделенная ДНК может быть дополнительно осаждена этанолом.

Размер продукта: 5 000 единиц