Основа тетратионатного бульона Мюллера-Кауфмана, 500гр

Состав

* Дегидратированный порошок, гигроскоспический по характеру, хранить в сухом месте в плотно закупоренных контейнерах при температуре 25°C и защитить от воздействия прямых солнечных лучей.

Указания по использованию

Растворите 82,05 г в 1000 мл дистиллированной воды. Дайте пропитаться в течение 10 минут, перемешайте, чтобы перемешать, и осторожно нагрейте до закипания. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ. Перед использованием охладить до 45°C. Добавьте 20 мл Йодно–йодистого раствора (20 г Йода + 25 г Йодида калия в 100 мл стерильной дистиллированной воды с 9,5 мл 0,1% раствора бриллиантового зеленого) и 1 флакон ДОБАВКИ НОВОБИОЦИНА (TS 051). Хорошо перемешайте и разлейте в стерильные пробирки.

Примечание: Из-за присутствия карбоната кальция, приготовленная среда образует опаловый раствор с белым осадком. При необходимости, скорректируйте pH до желаемого значения, соблюдая используемый протокол.

Внешний вид: Светло-зеленый раствор, образующий белый осадок при отстаивании

pH (при 25°C): 7,8 ± 0,2

Принцип

ОСНОВА ТЕТРАТИОНАТНОГО БУЛЬОНА МЮЛЛЕРА-КАУФМАНА используется для обогащения и выделения Salmonellae из продуктов питания и животных кормов. Впервые среду описал Мюллер в 1923 г. для ингибирования колиподобных бактерий с одновременным допуском развития тифозных и паратифозных бацилл. Среда содержит Ферментативный гидролизат казеина и Папаиновый гидролизат соевой муки, являющиеся источниками азота и углерода для роста микроорганизмов. Тиосульфат натрия отвечает за образование тетратионата при добавлении йода к культурной среде. Тетратионат подавляет рост колиформных и других кишечных бактерий и большинства интестинальных бактерий. Хлорид натрия высвобождает необходимые электролиты для транспортировки и осмотического баланса. Карбонат кальция в среде нейтрализует образование серной кислоты, когда тетратионат понижен. Бриллиантовый зеленый, бычья желчь и добавка Новобиоцина ингибируют рост грамположительных бактерий за исключением Salmonella.

ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЕ ОБОГАЩЕНИЕ и ИЗБИРАТЕЛЬНОЕ ОБОГАЩЕНИЕ

1. Добавьте 25 г образца в 225 мл забуференной пептонной воды (TM 307) и инкубируйте при 37 ± 1°C в течение 18 ± 2 часов.

2. Поместите 0,1 мл предварительно обогащенной культуры в 10 мл Соевого бульона Раппапорта-Вассилиадиса (TM 1282). Инкубируйте при 41,5ºC в течение 24 ± 3 часов.

3. Охладите среду до 25°C.
4. Поместите 1 мл предварительно обогащенной среды в 10 мл Основы бульона Мюллера-Кауфмана, включая йодно-йодистый раствор и 5 мл раствора новобиоцина, как описано выше. Инкубируйте при 37 ± 1ºC в течение 24 ± 3 часов.
5. Изолируйте на XLD-агаре (TM 1621) и на второй среде с выборочным выделением, с помощью платиновой петли.

6. Используя хорошо оформленные колонии, засейте также на питательный агар, который служит в качестве отправной точки для правильной морфологической идентификации.