Pfu Plus полимераза, 5 ед./мкл 200 ед.

Pfu Plus полимераза является термостабильным рекомбинантным ферментом массой прибл. 92кДа. Источник происхождения этого фермента Pyrococcus furiosus. Максимальная активность фермента проявляется при темп. 70-74 °С (хотя фермент может работать и при более низких температурах от 25 °С), время полужизни при 94 °С составляет не менее 30 мин. Фермент осуществляет синтез ДНК в направлении 5'->3' в присутствии ионов Mg²⁺ и при соответствующем значении рН, а также обладает 3'->5' экзонуклеазной активностью (так называемая "проверочная активность" - "proofreading activity"). Наличие 3'->5' экзонуклеазной активности делает фермент пригодным для ПЦР, где необходимо получение продукта с высокой точностью синтеза. При работе в оптимальных условиях Pfu Plus полимераза допускает минимальное количество ошибок по сравнения с другими термостабильными полимеразами. Амплификаты, полученные с использованием Pfu Plus полимеразы, не имеют на концах выступающую букву A, т.е., являются тупоконечными. Это позволяет клонировать полученный продукт без дополнительных обработок. Оптимальная длина амплификата, которую мы рекомендуем получать с использованием Pfu Plus полимеразы 2'000 п.н.

Важная особенность Pfu полимеразы заключается в том, что наличие 3'->5' экзонуклеазной активности делает этот фермент "медленным". При этом снижается чувствительность к низкокопийной матрице и сокращается выход продукта.

Хранение: - 20 °C

Состав буфера

• Буфер с Mg2+ (x10):
•    700 mM Трис-HCl, pH 8.6 / 25°C, 166 mM (NH4)2SO4, 25 mM MgCl2
• Буфер без Mg2+ (x10):
•    700 mM Трис-HCl, pH 8.6 / 25°C, 166 mM (NH4)2SO4

Применение

• проведение высокоточного ПЦР
• подготовка для клонирования и другие приложения, требующие высокой точности синтеза
• мечение ДНК различными меченными нуклеотидами (радиоактивными и нерадиоактивными)