Набор для определения мультирезистентности микобактерий GenoType MTBDRplus (наб-12тест)

GenoType MTBDRplus VER 2.0 - это качественный тест для диагностики in vitro, для идентификации комплекса Mycobacterium tuberculosis и определения его устойчивости к Рифампицину (RMP) и/или Изониазиду (INH) в положительных образцах мокроты или в отрицательных клинических и культивированных образцах. В туберкулёзный комплекс, входят следующие М. tuberculosis, вызывающие ТВ: М. tuberculosis, М. africanum, М. bovis subsp bovis, М. bovis subsp. саргае, M. bovis BCG, M. microti, M. canettii и M. pinnipedii .Выявление устойчивости к рифампицину возможно при детекции наиболее значимых ассоциированных мутаций гена rpoВ, (кодирующего бета субъединицу РНК полимеразы). Для выявления устойчивости к изониазиду, исследуют ген katG, (кодирующий каталазу пероксидазу) и область промотора в гене inhA (кодирующего NADH эноил АСР редуктазу).

Принцип тестирования:

Метод основывается на технологии ДНК-стрип (DNA•STRIP) и состоит из трех этапов:

1. Выделение ДНК
2. Мультиплексная амплификация
3. Реверс-гибридизация.

Все реагенты, необходимые для амплификации, например, полимераза или праймеры включены в Амплификационную смесь Amplification Mixes А и В (АМ-А и АМ-В) и оптимизированы для данного теста. Мембраны стрипов покрыты специфическими зондами, комплементарными к амплифицированным нуклеиновым кислотам. После химической денатурации, одноцепочечные ампликоны связываются с зондами (гибридизация). Высоко специфичное связывание комплементарных цепей ДНК обусловлено жёсткими условиями, которые создаются в результате оптимального сочетания состава буфера и определённой температуры. Таким образом, зонды могут достоверно распознавать несколько вариантов последовательностей в тестируемой области гена Конъюгированная стрептавидином щелочная фосфатаза связывается с биотином ампликонов посредством фрагментов стрептавидина. В итоге, щелочная фосфатаза превращает добавленный субстрат в окрашенную форму, которая становится видимой на мембране стрипов, как цветной преципитат. Простая и быстрая оценка полученных результатов проводится с помощью прилагаемого шаблона.

Условия хранения.

Хранить все компоненты Комплекта 1 при 2-8°C, компоненты Комплекта 2 хранить при -20°C и строго изолировано от контаминирующей ДНК.

Не допускайте повторных циклов замораживания и оттаивания AM-A и AM-B; при обработке небольшого количества образцов за одно тестирование, аликвотируйте AM-A и AM-B.

После окончания срока годности, реактивы не использовать.

Утилизация и уничтожение неиспользованных реагентов должны происходить в строгом соответствии с федеральными, государственными и местными законами.

Область применения

Данный тест показан для диагностических целей и предназначен для использования в медицинских лабораториях. Не применяется в ветеринарии.