Колумбийский агар

Coстав

* Обезвоженный порошок, гигроскопичный в естественной среде, хранить в сухом месте в герметично закрытой таре при температуре не выше 25 ° C, в защищенном от прямых солнечных лучей месте.

Инструкции по применению

Растворите 44 г в 1000 мл дистиллированной воды. Медленно нагрейте до кипения, осторожно помешивая, до полного растворения среды. Стерилизуйте автоклавированием при 15 фунтах на квадратный дюйм (при 121°С) в течение 15 минут. Охладите до температуры 45-50ºC и асептически добавьте в среду ГЕНТАМИЦИНОВУЮ ДОБАВКУ (TS 217). Хорошо перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Внешний вид: Гель светло-янтарно-желтого цвета, слегка опалесцирующий.

pH (при 25°C): 7.4 ± 0.2

Принцип действия

КОЛУМБИЙСКИЙ АГАР является высокопитательной и селективной средой для культивации организмов со сложными питательными потребностями, особенно при использовании в качестве основы для кровяного шоколадного агара. Он также может быть использован в качестве селективной среды для выделения путем добавления антибиотиков. Это богатая питательная среда общего назначения, разработанная Элленером и др.5 из ​​Колумбийского университета. Колумбийский агар соответствует гармонизированным требованиям Фармакопеи США/Европы/Японии.1,2,3,4

Сочетание панкреатического гидролизата казеина, панкреатического гидролизата мяса и панкреатического гидролизата сердца обеспечивает наличие азота, витаминов и аминокислот. Кукурузный крахмал добавлен в качестве источника углерода. Дрожжевой экстракт обеспечивает комплекс витаминов группы B. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Агар действует в качестве отвердителя. Обогащение кровью (5 - 10%) обеспечивает дополнительные факторы роста для микроорганизмов со сложными питательными потребностями, а также помогает в определении гемолитической реакции. Гемолитическая картина может меняться в зависимости от источника животной крови и типа используемой базальной среды.6 В принципе, кровяной агар является относительно свободным от содержания сахаров, которые, как сообщалось, оказывают отрицательное влияние на гемолитические реакции гемолитических стрептококков. Посейте в среду колумбийского агара небольшое количество (не более 100КОЕ) соответствующих микроорганизмов и инкубируйте в анаэробных условиях при температуре 30 - 35 ° C в течение 18 - 48 часов. С целью выделения, посейте штрихом инокуляционную петлю на колумбийском агаре и инкубируйте в анаэробных условиях при 30-35ºC в течение 48 часов.

Для колумбийского агара с добавлением крови исследуйте гемолитическую реакцию через 18 – 24 часа и 48 часов инкубационного периода. Существует следующих четыре типа гемолиза среды кровяного агара7:

1. Альфа-гемолиз (α) - это снижение уровня гемоглобина до метгемоглобина в среде, окружающей колонию. Это дает зеленое изменение цвета среды.
2. Бета-гемолиз (β) - это лизис красных кровяных клеток, создающий четкую зону вокруг колонии.
3. Гамма гемолиз (γ) указывает на отсутствие гемолиза. Нет разрушения красных кровяных клеток, и никаких изменений в среде не происходит.
4. Альфа-прайм-гемолиз (α') – это небольшая зона полного гемолиза, которая окружена зоной частичного лизиса.