T4 ДНК-лигаза
  • T4 ДНК-лигаза
  • T4 ДНК-лигаза

T4 DNК -лигаза, высокой концентрации

0,0000 €

T4 ДНК-лигаза катализирует образование фосфодиэфирной связи между соседними 5'-фосфатными и 3'-гидроксильными концами в дуплексной ДНК или РНК. Фермент восстанавливает однонитевые ники в дуплексной ДНК, РНК или ДНК / РНК-гибридах. Он также соединяет фрагменты ДНК с когезивным или тупым концом, но не имеет активности на одноцепочечных нуклеиновых кислотах.

T4 ДНК-лигаза требует АТФ в качестве кофактора.

Количество
Под заказ

Звонок по запросу

Особенности

  • Активные рестрикционные ферменты, ПЦР и RT-буферы (при добавлении АТФ)
  • Лигирование с быстрым липким концом завершают в течение 10 минут при комнатной температуре
  • Поставляется с раствором ПЭГ для эффективного лигирования на тупых концах

Применение

  • Клонирование рестрикционных ферментов генерирует фрагменты ДНК
  • Клонирование продуктов ПЦР
  • Соединение двухцепочечных олигонуклеотидных линкеров или адаптеров к ДНК
  • Сайт-направленный мутагенез
  • Полиморфизм длины расширенного фрагмента (AFLP)
  • Лигаза-опосредованное обнаружение РНК
  • Ремонт никеля в дуплексной ДНК, РНК или ДНК / РНК-гибридах
  • Самоклассификация линейной ДНК.

Включает

  • T4 ДНК-лигаза
  • 10X T4 ДНК-лигазный буфер
  • 50% раствор ПЭГ

Заметки

  • Связывание T4 ДНК-лигазы с ДНК может привести к сдвигу полосы в агарозных гелях. Чтобы этого избежать, инкубируйте образцы с 6X ДНК загрузочным красителем и раствором СДС при 70 °C в течение 5 мин или 65 °C в течение 10 минут и охладите на льду перед электрофорезом.
  • Объем реакционной смеси лигирования не должен превышать 10% от объема компетентной ячейки в процессе трансформации.
  • Перед электро-трансформацией удалите T4 ДНК-лигазу из лигирующей смеси, используя спиновые колонки или экстракцию хлороформа. Выделенная ДНК может быть дополнительно осаждена этанолом.

Размер продукта: 5 000 единиц

EL0013