Ампициллин, упак-5катриджей

Состав

Активные вещества

Ампициллин 10 мкг/диск

Внешний вид

Бумажный диск-фильтр диаметром 6 мм, помеченный надписью “AMP 10” по центру с обеих сторон

Процедура

1. Методом Бауэра-Кирби подготовьте чашки Петри с агаром МЮЛЛЕРА-ХИНТОНА (TM 339/TM 236) для быстрорастущих аэробных организмов. Среда, используемая на чашках, должна быть стерильной и нанесена слоем около 4 мм.
2. Засейте 4-5 похожих колоний с помощью микробиологической бактериологической петли или бактериологической иглы в 5 мл СОЕВОГО БУЛЬОНА TRYPTONE (TM 419) и инкубируйте при температуре 35-37°C в течение 2-8 часов до достижения легкой мутности. Сравните мутность инокулята с соответствующим стандартом Макфарланда 0,5 (приготовленного путем смешивания 0,5 мл 1,175% хлорида бария и 99,5 мл 0.36N серной кислоты). При необходимости разбавьте инокулят или продолжите инкубирование для достижения сравнимой мутности. В ином случае инокулят можно стандартизировать любым другим подходящим оптическим методом (суспензия с оптической плотностью 0,08 – 0,13 при длине волны 625 нм).
3. Погрузите стерильный нетоксичный хлопчатобумажный тампон на деревянном аппликаторе в стандартизированный инокулят и отожмите его несколько раз о верхний край внутренней стороны стенки пробирки для устранения избытка жидкости. Засейте штрихами всю поверхность агара тампоном трижды, поворачивая чашку Петри на 60° между мазками. Оставьте крышку открытой на 5-15 минут для высыхания инокулята.
4. Наложите диски, используя правила асептики. При использовании картриджей, диски можно наносить специальным аппликатором. При использовании чашек, нанесите диски с помощью стерильных щипцов.
5. Располагайте диски так, чтобы расстояние между их центрами составляло не менее 24 мм. В случае с микроорганизмами со сложными питательными потребностями, а также для пенициллина и цефалоспорина рекомендуется накладывать диски на расстоянии не менее 30 мм между центрами.
6. Незамедлительно инкубируйте при температуре 35 ± 2°C в течение 16-18 часов или дольше при необходимости. Микроорганизмы со сложными питательными потребностями необходимо инкубировать при необходимой температуре в течение определенного времени.
7. Используя калиброванный инструмент (zone scales), измерьте зоны полного подавления и зафиксируйте диаметр зон до ближайшего целого миллиметра

Принцип

Тестирование микробиологической чувствительности (AST) бактериальных и грибковых изолятов является общепринятой и важной техникой в большинстве клинических лабораторий. Результаты данных тестов используются для выбора наиболее подходящего антимикробного агента против возбудителя инфекции. До 1950 гг. лаборатории не располагали методологией и оборудованием для точного определения in vitro реакции организмов на действие антимикробных агентов. Бауэр и другие начал развитие стандартизированных методов определения микробиологической чувствительности, используя диско-диффузионный метод. Однако результаты чувствительности могут не всегда коррелировать с результатом терапии пациентов. Реакция инфицированного пациента на действие антимикробного агента является сложным взаимодействием реакций организма, динамики действия препарата и микробной активности. Тестирование микробиологической чувствительности может проводиться количественным или качественным методами. Диско-диффузионный метод является качественным методом тестирования. Национальный Комитет Клинических и Лабораторных Стандартов (NCCLS), сейчас известный как Институт Клинических и Лабораторных Стандартов (CLSI), опубликовал обширную информацию касательно диско-диффузионного метода. Тестирование диффузии в агаре с использованием дисков является наиболее удобным и широко используемым методом для рутинного тестирования микробиологической чувствительности. В текущей и последующей практике бумажные диски, пропитанные антимикробным агентом, наносятся на поверхность агара. Всемирная Организация Здравоохранения (ВОЗ) и Федеральное управление по лекарственным средствам США (FDA) опубликовали стандартизированные справочные методики для дисковых систем, основанные на методе Бауэра-Кирби. Данные методики периодически обновляются Институтом Клинических и Лабораторных Стандартов (CLSI) (ранее известным как Национальный Комитет Клинических и Лабораторных Стандартов (NCCLS)).