Hot Tag полимераза, 5 ед./мкл

HotTaq полимераза представляет собой химически модифицированную версию Taq полимеразы. Особенность HotTaq полимеразы в том, что она позволяет осуществлять постановку ПЦР с "горячим стартом" (Hot Start PCR). Использование HotTaq полимеразы увеличивает чувствительность и специфичность, позволяет повысить выход продукта, уменьшить неспецифическую амплификацию и получить результат там, где в условиях обычной ПЦР продукт вообще не образуется. Источник происхождения этого фермента - Thermus aquaticus. Максимальная активность фермента проявляется при темп. 70-74 °С, время полужизни при 94 °С составляет прибл. 45 мин. Фермент осуществляет синтез ДНК в направлении 5'->3' в присутствии ионов Mg²⁺ и при соответствующем значении рН, а также обладает 5'->3' экзонуклеазной активностью (эта активность проявляется только при работе фермента на двухцепочечной ДНК). Наличие 5'->3' экзонуклеазной активности делает фермент пригодным для использования его в ПЦР в реальном времени. Амплификаты, полученные с использованием HotTaq полимеразы, могут иметь на концах выступающую букву A. Это не мешает клонированию. При необходимости получать амплификаты без выступающей буквы мы рекомендуем использовать Pfu или LR полимеразы. Максимальная длина амплификата, которую можно получить с использованием HotTaq полимеразы прибл. 5'000 п.н..

Для активизации фермента перед проведением ПЦР необходимо прогреть реакционную смесь с ферментом при 94 °С в течении 10-15 мин. (горячий старт). Фермент со временем "стареет" и должен быть использован в течение 6 месяцев с момента продажи.

Хранение: - 20 °C

Состав буфера     

Буфер без Mg²⁺ (x10):

   700 mM Трис-HCl, pH 8.3 / 25°C, 166 mM (NH₄)₂SO₄

Применение        

проведение ПЦР с горячим стартом

ПЦР в реальном времени