Солевой агар, 500 гр

Инструкция по использованию

Растворите 23,50 г в 1000 мл дистиллированной воды. Нагрейте, чтобы полностью растворить среду. Стерилизуйте путем автоклавирования при 121 ºC в течение 15 минут. После охлаждения до 45-50 °С добавьте кровь, чтобы получить конечную концентрацию 5%. Хорошо перемешатйте и распределите по желанию.

Дополнительный тест: планшеты, содержащие 7 мл среды, сушат в течение ночи при комнатной температуре и хранят при 4 °С до использования. Перед использованием тестовые лунки разрезают на агаре, используя пространство шаблонов испытательных лунок на расстоянии 3 см и 2 см от края пластины. Сделайте 2 дополнительных лунки на расстоянии 3 см от центра пластины. Периферийные лунки дублированных пластин заполняют неразбавленным экстрактом (экстракция альфа-токсином) и восемью двойными разведениями экстракта. Чтобы определить, является ли гемолиз, вызванный экстрактом, альфа-токсином, часть разведения 1: 2 экстракта смешивают с альфа-токсином C. perfringens и с диагностической антисывороткой типа C. perfringens, содержащей альфа-токсин, и помещают в две центральные скважины. Планшеты инкубируют в течение 24 часов при 35 °С и исследуют для гемолитических зон, окружающих лунки. 1 миллионная зона гемолиза считается значительной.

Внешний вид: базальная среда дает светло-желтый цвет, прозрачный гель. При добавлении эритроцитов красный цвет непрозрачный.

рH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2

Принципы

Солевой агар используется для обнаружения альфа-токсина в Clostridium perfringens. Тепло-лабильный энтеротоксин, продуцируемый только спорулирующими клетками, вызывает основные симптомы диареи при отравлении перригренов. Энтеротоксин, по-видимому, высвобождается in vivo в кишечнике споровирующими организмами. Следовательно, альфа-токсин можно использовать в качестве показателя для обнаружения присутствия Clostridium perfringens в пище. Однако жизнеспособность клеток C.perfringens теряется, если подозрительные образцы пищи замораживаются. Хлорид натрия обеспечивает существенные ионы. Клетки крови добавляют в среду для изучения гемолитических реакций, что косвенно помогает в обнаружении альфа-токсина.