Псевдомонадный агар (для пиоцианина), 500 гр

Инструкция по использованию

Растворите 46,4 г в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина. Осторожно нагрейте до кипения и полностью растворите среду. Стерилизуйте путем автоклавирования при 121 °C в течение 15 минут. Охладите до 45-50 °С и распределите по желанию.

Внешний вид: кремовый до желтого цвета, прозрачный до слегка опалесцирующего геля

pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2

Принцип

Псевдомонадный агар используется для обнаружения продукции пиоцианина по видам Pseudomonas или для обнаружения пиоцианина, водорастворимого пигмента по видам Pseudomonas. Поджелудочный перевар ткани животного обеспечивает азот, углерод, серу и другие микроэлементы, которые необходимы для роста видов Pseudomonas. Сульфат калия и хлорид магния, который усиливает образование пиоцианина и подавляет продукцию флуоресцеина. Некоторые штаммы Pseudomonas производят небольшое количество флуоресцеина, что приводит к сине-зеленой окраске. Эта среда усиливает выработку пиоцианина, но ингибирует образование флуоресцеинового пигмента. Пигмент флуоресцеина диффундирует из колоний Pseudomonas в агар и показывает синюю окраску. Производящий пиоцианин штамм Pseudomonas обычно также продуцирует другой пигмент, такой как флуоресцеин. Поэтому он должен быть дифференцирован от других простых флуоресцентных продуцирующих Pseudomonas другими способами. Pseudomonas aeruginosa строят колонии, окруженные сине-зеленой зоной из-за производства пиоцианина. Хотя эта среда особенно усиливает производство пиоцианина (синий пигмент), возможно, что образуются красный (пироубин), желто-зеленый (пиовердин, флуоресцеин) или коричневый (пимеланин) пигменты и маскируют пиоцианин. Для подтверждения пиоцианина окрашенные пигменты можно экстрагировать хлороформом. 0,5 - 1 мл хлороформа добавляют на культуральный наклон и его встряхивают в течение нескольких минут, пока пиоцианин не рассеивается, что делает растворитель синим. После этого добавляют несколько капель HCl и появляется быстрое изменение цвета от синего до красного, что подтверждает присутствие пиоцианина. Если нет или мало роста, инкубируйте при 25-30 °C в течение 1-2 дней и наблюдайте за ростом и пигментом. Температура может быть определяющим фактором, так как большинство других флуоресцентных штаммов не будет расти при 35 °C. Скорее, они растут при 25-30 °C.