HiFi полимераза, 5 ед./мкл, 500 ед.

HiFi полимераза представляет собой специально подобранную смесь ферментов Pfu Plus и Taq полимеразы для проведения более эффективной полимеразной цепной реакции, чем с использованием Taq полимеразы. Максимальная активность фермента проявляется при темп. 70-74 °С (хотя фермент может работать и при более низких температурах от 25 °С), время полужизни при 94 °С составляет прибл. 45 мин. Фермент осуществляет синтез ДНК в направлении 5'->3' в присутствии ионов Mg²⁺ и при соответствующем значении рН, а также обладает небольшой 3'->5' экзонуклеазной активностью (так называемая "проверочная активность" - "proofreading activity"). Наличие 3'->5' экзонуклеазной активности делает HiFi полимеразу более эффективной в ПЦР, чем Taq полимераза. При работе в оптимальных условиях HiFi полимераза допускает меньшее количество ошибок по сравнения с Taq полимеразой. Амплификаты, полученные с использованием HiFi полимеразы, имеют на концах незначительное количество выступающей буквы A. Это позволяет клонировать полученный продукт без дополнительных обработок. HiFi полимераза обладает также 5'->3' экзонуклеазной активностью (эта активность проявляется только при работе фермента на двухцепочечной ДНК). Наличие 5'->3' экзонуклеазной активности делает фермент пригодным для использования его в ПЦР в реальном времени. Максимальная длина амплификата, которую можно получить с использованием HiFi полимеразы прибл. 5'000 п.н.

Важная особенность: HiFi полимераза не является ферментом, предназначенным для высокоточного синтеза (хотя точноcть синтеза HiFi полимеразы выше по сравнению с Taq полимеразой). При необходимости высокоточного синтеза мы рекомендуем использовать Pfu Plus полимеразу.

Хранение: - 20 °C

Состав буфера

Буфер с Mg²⁺ (x10):

700 mM Трис-HCl, pH 8.6 / 25°C, 166 mM (NH₄)₂SO₄, 25 mM MgCl₂

Применение

• проведение ПЦР, RealTime PCR
• мечение ДНК